Artemisia artemisinin, ekstrakcija, malarija SADRŽAJ U ARTEMISIA ANNUA L EKSTRAKTI PRIMJENIH RAZLIČITIM METODAMA

SADRŽAJ ARTEMIZININA U ARTEMISIA ANNUA L EKSTRAKTI DOBIVENIH RAZLIČITIM METODAMA Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, SV Zhshzhitzhapova, LD Državno sveučilište Padnaeed Buryat, st. Smolin, 24a, Ulan-Ude (Rusija) Tomsk Državno sveučilište, Lenina Ave., Tomsk (Rusija) Bajkalni institut za upravljanje prirodom, Sibirski ogranak Ruske akademije znanosti, ul. Sakhyanova, 8, Ulan-Ude (Rusija)

Razmatrana su pitanja o izolaciji artemisinina iz Artemisia annua L. i njegovom kvantitativnom određivanju metodom HPLC-MS. Artemisinin je izoliran raznim metodama ekstrakcije: maceracijom, ultrazvukom i ekstrakcijom CO2. Komponentni sastav CO2 i heksanskog ekstrakta ispitivan je pomoću GC-MS.

uvod

Artemisinin (1) je peroksidni seskviterpen [1], koji je visoko učinkovit antimalarijski lijek i prekursor snažnijih spojeva, kao što su artemeter, artesunat i neki drugi. Važnost artemisinina i njegovih derivata temelji se na vrlo brzom djelovanju spoja ovog tipa na glavni patogen Plazmodium falciparum, koji također uzrokuje bolest mozga. Pokazalo se da je kemijska i biokemijska sinteza artemizinina vrlo skupa, te je stoga trenutno neosnovana kao glavni izvor proizvodnje artemisinina [2].

Malariju uzrokuje mikroorganizam - Plasmodium malaria. Postoje 4 vrste takvog plazmodija, parazitske u ljudskom tijelu: Plazmodium vivax, P. ovale, P. malariae i P. falciparum. Sredinom 20. stoljeća, zahvaljujući širokoj uporabi kinina i njegovih derivata, bilo je moguće značajno smanjiti broj oboljelih od malarije. Međutim, od 60-ih. Malarija iz prošlog stoljeća ponovno je podsjetila na sebe. Razlog tome je činjenica da su se u Tajlandu i Južnoj Americi pojavile i proširile malarija Plasmodium (P. falciparum), otporna na kinin, klorokin, meflokin i druge lijekove na bazi kinolina [3, 4]. Problem pronalaženja novih učinkovitih antimalarijskih lijekova, među kojima je i predložen artemisinin, postao je aktualan. Ovaj jedinstveni spoj otkriven je u Kini (kinesko ime je qinghaosu). Radovi su započeti 1967. godine i nazvani su “Program 523” [5]. Izdvojen je iz pelina godišnje Atemisia annua L., koji se distribuira na području bivšeg SSSR-a, a obuhvaća područja Altaja, Transbaikalije, Amurske regije, Kazahstana, Kirgistana, Uzbekistana i Turkmenistana. Pelin je široko zastupljen u Kini i drugim zemljama [6]. Ukupna količina artemizinina izoliranog iz različitih dijelova A. annua iznosi oko 0,01 i 1,4% suhe listne mase [2].

Artemisia annua L. je glavna sirovina za proizvodnju artemizina. Svjetska zdravstvena organizacija 2001. preporučila je uporabu artemisinina u terapiji prve linije za kontrolu malarije, što je dovelo do povećanja površine pod jednogodišnjom pelinom. Uglavnom, pelin se godišnje uzgaja u istočnoj Aziji, uglavnom u Kini i Vijetnamu (70% površine na svijetu), nedavno uveden u kulturu u istočnoj i južnoj Africi (20% površine na svijetu), što osigurava četvrtinu globalnih zdravstvenih potreba. [7].
Osim artemisinina, A. annua se cijeni i po svom eteričnom ulju, koje ima karakterističnu slatku, travnatu aromu i koristi se u parfimerijskim i kozmetičkim proizvodima. Osim toga, ulje ima antibakterijska svojstva i može se koristiti za liječenje kožnih bolesti. Osim seskviterpenskih laktona, koji imaju glavnu terapeutsku vrijednost, eterična ulja ove biljke sadrže značajnu količinu komponenti koje imaju vrijednost, kao što su 1,8-cineoleum, artemizijski alkohol i keton, borneol i drugi. također je analiziran fiziološki učinak lipofilnih ekstrakta na kožu [2].
U vezi s bogatim i raznolikim sastavom biološki aktivnih tvari sadržanih u Artemisia annua, potraga za novim područjima rasta godišnjeg pelina od velikog je interesa. U Republici Burjatiji raste 46 vrsta polinuma [8], uključujući Artemisia annua L. Sadržaj artemisinina u Poljskoj, jednogodišnji, koji raste u Burjatji, nije prethodno istraživan. Stoga je svrha ovog rada bila kvantitativno određivanje artemizinina u ekstraktima dobivenim različitim metodama ekstrakcije.

Eksperimentalni dio

Sirovina za proučavanje odabrana je nadzemni dio poljske godišnje Artemisia annua L., prikupljene u prvoj dekadi kolovoza 2010. u fazi cvatnje.
Izolacija artemizinina i drugih biološki aktivnih tvari (eterično ulje) provedena je različitim metodama ekstrakcije: maceracijom, ultrazvučnom ekstrakcijom i ekstrakcijom CO2 podkritičnom. Ekstrakcija je provedena na laboratorijskim instalacijama. Kao ekstrakti korišteni su heksan, etil acetat, etanol i CO2. Podaci i parametri ekstrakcije prikazani su u tablici 1. Ekstrakti iz taloga odvojeni su centrifugiranjem u centrifugi OP-8UHL4.2 pri 5000 okr / min i zatim filtrirani kroz sustav filtriranja uzorka.
Kvantifikacija artemisinina određena je HPLC-MS korištenjem Finnigan Surveyor tekućeg kromatografa visoke djelotvornosti opremljenog autosampler Plus autosampler i LC Pump Plus crpke s LCn Advantage MAX (ion trap) Finnigan detektorom, ionizacijska metoda - elektrosprej. Stupac "Hypersyl Gold" 150 × 4 mm, napunjen sorbensom od silikagela s C18 cijepljenim fazama (veličina čestica 5 μm), (proizveden od strane Thermo electronic corporation, USA). Elucija je provedena u izokratnom načinu (50% (A): 50% (B)), sastav početnog pufera (A) je vodena otopina mravlje kiseline, (pH = 3) + 2 ml zasićene otopine amonijevog acetata, pufer za eluiranje (B) - 100% acetonitrila. Volumetrijska brzina protoka eluensa je 0,5 ml / min, volumen injektiranog uzorka (autosampler) je 25 μl. Ionska registracija provedena je u modusu praćenja pozitivno nabijenih iona (Selected Ion Monitoring, SIM), s molekulskom masom 300 (zbog dodavanja amonijevog iona NH4 molekuli artemizinina) s širinom prozora (299-301) m / z. Kvantitativno određivanje provedeno je metodom internog standarda korištenjem standardnog uzorka iz Sigme.

Metode i parametri vađenja

Br. P / p Metoda ekstrakcije Ekstrakant Vrijeme ekstrakcije / parametri ekstrakcije Sadržaj Artemisinina u%, u smislu a.s.s.
1 Maceracija etanola 24 h / sirovina: odnos otapala (1: 5) 0,040 ± 0,002
2 Maceracija etanol 48 h / sirovina: omjer otapala (1: 5) 0,038 ± 0,002
3 Maceracija heksana 24 h / omjer uzorka: otapalo (1: 5) 0,039 ± 0,002
4 Ekstrakcija ultrazvukom etanol 15 min / omjer sirovina: otapalo (1: 5), frekvencija sondiranja 50 Hz, T = 25 ° C 0,039 ± 0,002
5 Ekstrakcija ultrazvukom etil acetat 15 min / sirovina: omjer otapala (1: 5), frekvencija sondiranja 50 Hz, T = 25 ° C 0,022 ± 0,001
6 CO2-ekstrakcija so2 24 h / brzina protoka 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6.0-6.2 MPa 0.054 ± 0.003

Dodatno, hlapljive komponente ekstrakta CO2 i heksana ispitane su kromatografsko-masenom spektrometrijom na plinskom kromatografu Agilent Packard HP 6890 s MSD 5973N kvadrupolnim detektorom. Koristili smo 30-metarski kvarcni stup TR-5 ms s unutarnjim promjerom d = 0,25 mm, debljine filma od 0,25 μm. Kromatografsko odvajanje provedeno je kako je opisano u [9]. Kvalitativno, sastojci ekstrakta određeni su uspoređivanjem punih masenih spektara s podacima knjižnice kromatografskih masenih spektrometrijskih podataka hlapljivih tvari biljnog podrijetla A.V. Tkachev, knjižnice NIST 08 i Wiley 275. Rezultati analize su prikazani u tablici 2.

Glavni sastojci ekstrakta CO2 i heksana
Relativna površina vrha Priključci Relativna površina vrha
Spojevi ekstrakta heksana iz ekstrakta CO2-ekstrakta
Ekstrakt CO2 Ekstrakt heksana
Monoterpenoidi s dugim lancem ugljikovodika
Tricicilen 140181 - Tricosane 103969 52288
a-pinene 1155320 - Tricozen-1 1956324 -
Camphene 2021028 - n-Pentakosane 534763 110485
R-pinen 371548 1683858 645634 - - -
n-heptakosan 279800 132358
3-carene

Ciklički ugljikovodici
limonen
Pentacyclo 576196 -
R-phellandren 587143 - [7.5.0.0 (2.8].0 (5.14) 0.
1,8-cineol 133599 - (7.11)] tetradekan
Artemisia keton 1413437 - 1,8-dimetilfenantren 3765681 1080289
Borneol 170158 707945 - - Flyuoren 3507465 319501
Bornil acetat

diterpenoidnih
sesquiterpenoids
Metil 3,5-bis (etilamino) benzoat 627581 283913
Cariofillen 370714 214560 - -

Karyofillen oksid
Germacren D 214913 -
R-Selinen 3053333 328535
a-cadinol 149485 -

Rasprava o rezultatima

Kao što se može vidjeti iz podataka prikazanih u tablici 1, najniži prinos artemizinina bio je (0.022%) ultrazvučnom ekstrakcijom s etil acetatom. Sadržaj artemizinina u ekstraktima izoliranim ultrazvučnom ekstrakcijom i maceracijom pomoću različitih otapala (heksan, etil alkohol) nije značajno različit 0,038-0,040% u smislu A. p. Kod inzistiranja s etilnim alkoholom pelina godišnje 24 i 48 sati, sadržaj artemizinina u dobivenim ekstraktima je približno jednak 0,040 i 0,038%. Najviši prinos artemizinina (0,054%) dobiven je tijekom prije kritične ekstrakcije CO2. Za usporedbu predstavljamo neke podatke o sadržaju artemizinina, u jednogodišnjem pelinu, koji raste na različitim područjima. Artemisia annua L., koja raste u različitim dijelovima Kine, sadrži od 0,01 do 0,22% artemisinina. Neki hibridi godišnjeg pelina koji se uzgajaju u Kini i Vijetnamu sadrže od 1,0-1,5% artemisinina [10]. Sadržaj artemizinina u A. annua, koji raste na području bivšeg SSSR-a, je sljedeći (vrijednosti su dane u odnosu na suhe sirovine): Gruzijski SSR (0,005%), Kirgistan SSR (0,025%), Moldavski SSR (0,01-0,02%), Krasnodar Territory (0,04%), Ukrajinski SSR (0,005-0,05%), Turkmenistan (0,05% u smislu a.s.c.), Kazahstan (0,01-0,05% u smislu S.S.S.) [11].
U proučavanju sastava ekstrakta godišnjeg pelina dobivenog CO2-ekstrakcijom i maceracijom, kada je kao ekstrakent korišten heksan, kromatografsko-masena spektrometrija pokazala je značajne razlike u sastavu tih ekstrakata. Monoterpenoidi, seskviterpenoidi, dugolančani ugljikovodici, ciklički ugljikovodici i diterpenoidi detektiraju se metodom masene spektrometrije.
Monoterpenoidi se nalaze samo u ekstraktu CO2. Glavne komponente CO2 ekstrakta su a-pinen, 3-caren, keton artemisije, (3-selenen, tricozen-1, 1,8-dimetilfenantren i fluoren.

U heksanskom ekstraktu pelina godišnjom plinskom kromatografijom-masenom spektrometrijom identificirani su uglavnom dugolančani ugljikovodici i ciklički ugljikovodici, 3-selenen je detektiran iz seskviterpenoida.
Osim artemisinina, koji je primarne ljekovite vrijednosti, eterično ulje sadrži velik broj komponenti biološke vrijednosti, kao što je artemizijski keton, 1,8-cineol, borneol, itd.

nalazi

1. Sadržaj artemizinina u različitim ekstraktima A. annua (nadzemni dio, faza cvatnje) koji raste na području Republike Burjatije određen je HPLC-MS.
2. Maksimalni sadržaj artemizinina nalazi se u ekstraktu CO2 (0,054% u smislu a.s.c.),
3. Pomoću kromatografske masene spektrometrije proučavan je sastav eteričnog ulja ekstrahiranog različitim metodama ekstrakcije.

Artemisia annua L.
Opis taksona

Ruska imena

taksonomija

slika

Biljke na karti

Botanički opis

Artemisia annua L. Sp. pl. (1753) 847; Bess. u Nouv. Mem. Soc. Nat. Mosc. III, 81; Dc. Prodr. VI, 119; LDB. Bl. Ross. II, 592; Boiss. Bl. ili. III, 371; Maxim. u Bull. Acad. Sc. Petersb. Viii, 528; Kuka. Bl. Br. Indijana III, 323; Com. u fl. Manchu. III, 659; Nakai, Fl. Korejski. II, 30; Fedch. Adyge. Sol. Turk. IV, 200; Rydb. North Am. Bl. 34, dio 3, 259; Pampan. u Nuovu. Giorn. Bot. Ital. N. S. XXXIV, 637; Hall i Clem. Artem (1923) 102; Com. i alice. Res. Sol. Daleki istok kr. II, 1036; Krasheniny. u fl. jug-istok. Europ. Dio SSSR, VI, 357; Grossg. Bl. Kavko. IV, 138; Krasheniny. i Krila. Bl. Zap. Sib. XI, 2816; Polyak. u Mayevsky, FL. 586. - A. chamomila Winkl. u Tr. Sveučilište Peterburg. bot. Vrt, X, 87; Fedch. op. Op. - Ic. Stirp. RAR. t. 193, f. 23; Gmel. Bl. srodnicima. II. 25. - Ex-GRF № 3152. - Jednogodišnji pelin.

Godišnji. Biljka je mirisna, zelena, gola ili s raspršenim, malim, susjednim dlačicama, ravnog, rebrastog, smeđeg ili ljubičasto-smeđeg stabljike visine 30–100 cm. lišće je točkasto-fosno-uljasto, donje petiolate, 3-5 cm duge. i 2-4 cm širine., ovalni, trostruki, segmenti zadnjeg reda duguljastog dlana, kratkog dlana; cijeli ili s 1-2 zuba, 1-2 mm duljine. i 0,5 mm širine; srednji i stabljikasti listovi su dvostruko pera, gornja sjedila, manja i manje složena, gornji listovi su jednostavni ili s malim brojem bočnih zrnaca. Košare su sferične, širine 2-2,5 mm, brojne, odbačene ili opuštene, na kratkim nogama, skupljene na kratkim granama, u b. m. duge, piramidalne cvatove metlica; omot je glatka, vanjski listovi su linearno duguljasti, zeleni, unutarnji ovalni ili gotovo okrugli, sa široko rubnim sjajnim rubom oko ruba; spremnik konveksan, gol; cvjetovi rubnih pištolja, 10-20 u broju, vijenac krunastih, točkastih, usko linearnih, lisnatih režnjeva, tup, izložen iz cijevi; cvjetovi diska su biseksualni, s brojem 12–30, cjevasti s uskim kapama, goli; anteri usko linearni, gornji privjesak izdužen, akutno-nagnut, bazalni režnjevi vrlo kratki, šiljasti; stup je kraći od prašnika, stigma stigme je linearna, ravna, blago odstupanja, na vrhu je ciliatna; duga 0,8–0,6 mm., duguljasto-jajasta, ravna, na vrhu s malom zaobljenom platformom, jedva oivičena uz rub. Kol VIII - IX.

U plićacima u blizini stana, vrtovima, vrtovima. - Europa. h.: Gornji Dnjestar., Gornji Dnjepar., Volž. Don., Volga. Donja. Don., Crna., Bess., Krim; Kavkaz: zapadni i istočni. Trans., Tal., Sri. Azija: Aral-Casp., Balkh., J.-Tarb., Tien-Shan., Syr-Dar., Pam. - Al., Amu-Dar., Horn. Turkmenski. Tot. var.: sri Heb., Srediz., Balk. -Maloaz., Arm.-Kurd., Iran, J.-Kashg., Kit., Jap., Mongolia, North. Amerika (izvanzemaljac).

Tip pogleda su crteži Ammana i Gmelina.

Kućanstva. VAL. Prinos eteričnog ulja je 0,1-0,64% (prema Goryajevu). Prema Joshikazu Imade (1937), cineol i supstanca C10H6O su u ulju; ovu tvar detaljno su proučavali Ashania i Joshitomi (1917); uz artemacyaketon, njegov izomer, izoartemisijeceton, pronađen je u ulju. Ovaj keton se mogao izolirati iz matične tekućine koja je ostala u pripravi polukarbosona artemcijaacetona. Seisi Takagi (1928), nastavljajući proučavanje japanske A. annua, na 4 komponente poznate u ulju, dodale su još 2 nove: kadinen i kariofilen. Na temelju istraživanja Rutovskog i Vinogradova (1929.), ulje se sastoji od α-pinena, cineola, kampena, artemizaketona i izoartemizieksetona, male količine borneola, octene i maslačne kiseline, kimuno aldehida (vjerojatno polikarbosona) i fenola (vjerojatno eugenola). U podzemnim dijelovima pronađena je mala količina alkaloida (Lazurievsky, Sadykov, 1939; Massagetov, 1947). Prema opažanjima na terenu (Yunatov, 1954), u zelenom stanju ne jede stoka. Prisutnost alkaloida potvrđuje M.I. Goryaeva, G.K. Kruglykhina, E.I. Satdarova (1959).

Sažetak i disertacija o medicini (14.04.02.) Na temu: Farmakognostička studija Artemisia annua L. i Artemisia sieversiana Willd. flora Burjatije

Sažetak doktorske disertacije iz područja farmakognostičke studije Artemisia annua L. i Artemisia sieversiana Willd. flora Burjatije

Kao rukopis

Soktoeva Tuyana Erdemovna

FARMAKOGNOSTIČKA ISTRAŽIVANJA ARTEMISIA ANNUA L. I ARTEMISIA SIEVERSIANA WILLD. FLYORS OF BURYATIA

04/14/02 - farmaceutska kemija, farmakognozija

Sažetak doktorskog rada za stupanj kandidata farmaceutskih znanosti

Disertacijski rad proveden je u Saveznoj državnoj proračunskoj obrazovnoj ustanovi visokog stručnog obrazovanja „Državno sveučilište Buryat“ Ministarstva obrazovanja i znanosti Ruske Federacije i osnivanju Ruske akademije znanosti Bajkalskog instituta za upravljanje okolišem, Sibirski ogranak Ruske akademije znanosti

Nadzornik: doktor kemijskih znanosti, profesor

Radnaeva Larisa Dorzhievna

Službeni protivnici: doktor bioloških znanosti, profesor

Antsupova Tatyana Petrovna

Kandidat za farmaceutske znanosti Mongolov Hanhai Purbuevich

Vodeća organizacija: država Perm

Ministarstvo zdravstva i socijalnog razvoja Ruske Federacije

Obrana će se održati 23. prosinca 2011. godine u 10 ° oh na sastanku Vijeća disertacije DM 003.028.02 u Institutu za opću i eksperimentalnu biologiju SB RAS na adresi: 670047, Ulan-Ude, ul. Sakhyanova 6.

Doktorski rad dostupan je u Središnjoj znanstvenoj knjižnici Znanstvenog centra Buryat SB RAS.

Sažetak objavljen 22. studenog 2011.

Znanstvena tajnica Katedre za doktorat bioloških znanosti

OPĆI OPIS RADA Relevantnost teme. Biljke roda Artemisia (pelin) su obećavajući izvori biološki aktivnih tvari, kao što je pelud od pepela Artemisia dracunculus L., pelin Artemisia absinthium L., pelin Artemisia vulgaris L. koji se često koristi u narodnoj, tradicionalnoj medicini i prehrambenoj industriji. Godišnji pelin Artemisia annua L. uspješno je uveden u kulturu u mnogim zemljama, a 2001. godine preporučila ga je WHO kao glavni izvor artemisinina, prvog izbora za liječenje malarije. Danas zemlje koje proizvode artemisinin osiguravaju oko četvrtine globalnih zdravstvenih potreba (Tolstikova, 2010; Xiao Wang, 2011). Iz jedne godine starosti izolirano je 137 biološki aktivnih spojeva, uključujući 40 seskviterpena, 10 triterpena, 7 kumarina, 46 flavonoida, što može poslužiti kao osnova za razvoj lijekova (Bhakuni, 2001). Osamdesetih godina dvadesetog stoljeća skupina znanstvenika (Schroeter, 1989.) pokušala je uzgojiti divlje uzgojni dio jednogodišnje flore SSSR-a u CISA-i (Moskva). Danas se veliki radovi na uvođenju predmeta prve godine provode na Državnom sveučilištu Tomsk. U Buryatia n. Godišnja je divlja vrsta.

Uz godišnji parazit u Burjatiji, Sivers pelin Artemisia sieversiana Willd je široko rasprostranjen, što je također obećavajuća vrsta. Trava Seabera sadrži flavonoide, eterično ulje, kumarine (Tkachev, 2002; Shatar, 1998; Hanina, 1999; Suleimenov, 2009). Eterično ulje Siversa od interesa je kao izvor chamazulena, netoksičnog spoja s protuupalnim, baktericidnim, regenerativnim učincima (Berezovskaja, 1991; Khanina, 1992).

Do sada nije provedena detaljna kemijska studija pelina i pelina Siversa godišnje flore Burjatije kao obećavajućih izvora biološki aktivnih tvari, stoga je njihovo proučavanje hitan zadatak.

Cilj: Farmakognostičko proučavanje Siversovog pelina Artemisia sieversiana Willd. i pelin godišnje Artemisia annua L. kao vrijedni izvori biološki aktivnih tvari.

Za postizanje tog cilja potrebno je riješiti sljedeće zadatke:

1. Identificirati anatomske i dijagnostičke znakove zračnog dijela Siversa i P. jednogodišnjeg, kako bi se utvrdili indikatori merchandisinga

sirovine, procjenjuju rezerve i mogućnost berbe na godinu i p. Siversa na teritoriju Republike Burjatije;

2. Proučiti kemijski sastav glavnih skupina biološki aktivnih tvari tih biljaka i odrediti njihov kvantitativni sadržaj, utvrditi lokalizaciju eteričnih ulja i artemizinina u pojedinim dijelovima biljaka, proučiti dinamiku njihove akumulacije u razvojnim fazama i odrediti optimalne uvjete sakupljanja;

3. Razviti metodu za kvantitativno određivanje artemizinina u nadzemnom dijelu jednogodišnjaka;

4. Utvrditi pokazatelje kvalitete i standarde za sadržaj osnovnih biološki aktivnih tvari, izraditi regulatornu dokumentaciju za ljekovite sirovine - travu pelina Sivers i travu jednogodišnjeg pelina.

Znanstvena novost. Utvrđene su glavne dijagnostičke značajke trave Sivers i P. godišnje, razvijeni su numerički pokazatelji potrebni za standardizaciju sirovina.

Izrađena je studija kemijskog sastava trave Siversa i trave jednogodišnje trave. Određen je sadržaj eteričnih ulja, flavonoida, masnih kiselina, makro i mikroelemenata. Flavonoidi - luteolin-7-glukozid, rutin, kvercetin i krioeriol detektirani su HPLC-MS metodom u ovim biljkama. Glavne masne kiseline u istraživanim vrstama pelina su palmitinska, linolna, linolenska, 10% oktadekenska kiselina također se nalazi u značajnom pelinu.

Utvrđeni su uvjeti za ekstrakciju artemisinina (vrsta ekstrakta, metoda ekstrakcije, vrijeme ekstrakcije) iz godišnje biljke i utvrđeno je da se maksimalna ekstrakcija artemizinina postiže ultrazvučnom i subkritičnom ekstrakcijom CO2. HPLC-MS je utvrdio da je najveća količina artemizinina u jednogodišnjoj dobi sadržana u fazi cvjetanja u cvatovima.

Studirao je dinamika nakupljanja eteričnog ulja, ovisno o fazi razvoja i dijelu postrojenja. Najveća količina esencijalnog ulja chamazulena p. Siversa akumulira se u fazama pupljenja i cvatnje u cvatovima.

Utvrđeni pokazatelji kvalitete BAS-a uključeni su u regulatorne dokumente.

Praktično značenje. Rezerve i mogući godišnji volumen nabave naselja Sivers i jednogodišnje naselje na teritoriju Republike Burjatije (naselje Sivers - od 0,1 do 73,7 tona godišnje, te naselje od godinu dana - od 1,2 do 122,3 tona godišnje).

Razvijena je tehnika za kvantitativno određivanje artemizinina u p. Trava godišnjom HPLC-MS metodom. Uvjeti za pripremu uzoraka sirovina za analizu za kvantitativno određivanje artemizinina su znanstveno utemeljeni.

Provedena je standardizacija sirovina, razvijeni su FS projekti - „Sivers Wormwood Herbal“ i „Wormwood One-Grass“.

Stupanj provedbe. Metoda vađenja podataka o eteričnim uljima i mikroskopskim analizama ispitana je i uvedena u odgojno-obrazovni proces Odjela za farmaciju pri Saveznom državnom proračunskom obrazovnom zavodu za visoko strukovno obrazovanje „Državno sveučilište Buryat“ (Zakon o provedbi br. 1 od 6. rujna 2011.). Na razmatranje su pripremljeni projekti FS na travi pelina Sivers i jednogodišnjeg pelina.

U obranu se izvode:

• rezultati istraživanja anatomske strukture, zaliha, kriterija autentičnosti Siversa i P., raste u Burjatji;

• rezultati kemijskog ispitivanja biološki aktivnih tvari i njihova sezonska dinamika akumulacije;

• rezultati studija o standardizaciji nadzemnog dijela Siversa i str.

Potvrda rada. Glavne odredbe rada prezentirane su i raspravljane na: znanstveno-praktičnoj konferenciji s međunarodnim sudjelovanjem „Razvoj tradicionalne medicine u Rusiji: iskustvo, istraživanje, perspektive“ (Ulan-Ude, 2010); 7. zimski simpozij o kemometriji "Moderne metode analize podataka" (Sankt-Peterburg, 2010); međunarodna znanstvena konferencija posvećena 15. godišnjici Buryatskog državnog sveučilišta "Aktualne studije o Bajalskoj Aziji" (Ulan-Ude, 2010); V međunarodna znanstveno-praktična konferencija "Prioriteti i obilježja razvoja Bajkalskog kraja" (Ulan-Ude, 2011); X međunarodna znanstveno-praktična konferencija "Problemi botanike Južnog Sibira i Mongolije" (Barnaul, 2011); IV. Sve-ruska konferencija "Novi napredak u kemiji i kemijskoj tehnologiji biljnog materijala" (Barnaul, 2009); XVI Međunarodna konferencija studenata, postdiplomaca i mladih znanstvenika "Lomonosov-2009" (Moskva, 2009); XV. Međunarodna ekološka studentska konferencija "Ekologija Rusije i susjednih teritorija" (Novosibirsk, 2010); II. Sve-ruska znanstveno-praktična konferencija studenata, diplomiranih studenata i mladih znanstvenika "Tehnologije i oprema kemijske, biotehnološke i prehrambene industrije" (Biysk, 2009); Sve-ruska znanstveno-praktična konferencija "Vegetacija

Bajkalsko područje i susjedna područja ”(Ulan-Ude, 2011); V školski seminar mladih znanstvenika u Rusiji „Problemi održivog razvoja regije“ (Ulan-Ude, 2009); regionalna znanstveno-praktična konferencija mladih s međunarodnim sudjelovanjem "Tehnologije i materijali koji štede okoliš i resursima" (Ulan-Ude, 2010).

Rad je proveden u sklopu istraživačkih projekata: RFBR: 08-04-90202-Mong_a "Proučavanje biogenetskih obrazaca biosinteze biološki aktivnih spojeva endemičnih biljaka Srednje Azije" (2008-2009), 08-04-98037-r_sibir_a "Kemijski sastav biljaka kao indikator stanje ekosustava Bajkalske regije "(2008-20 Yugg,); interdisciplinarni integracijski projekt br. 93 "Razvoj istraživanja u području medicinske kemije i farmakologije kao znanstvene osnove za razvoj domaćih lijekova"; zajednički projekt s Akademijom znanosti Mongolije "Dobivanje novih lipo-i nanosomalnih oblika lijekova pomoću prirodnih sirovina"; RFBR: 10-03-16001-mob_ros "Mobilnost mladih znanstvenika" (2010), 11-03-90705-mob_st znanstveni rad (obuka) mladih ruskih znanstvenika u vodećim znanstvenim organizacijama Ruske Federacije 2011 (2011).

Publikacije. Prema rezultatima objavljeno je 17 znanstvenih radova, od kojih su 3 objavljena u časopisima koje preporučuje Visoka atestacijska komisija Ministarstva obrane i znanosti Ruske Federacije.

Opseg i struktura rada. Disertacijski rad je prezentiran na 172 stranice teksta na pisanom stroju i sastoji se od uvoda, pregleda literature (1 poglavlje), eksperimentalnog dijela (4 poglavlja), općih zaključaka, popisa referenci i aplikacija. Rad je ilustriran s 37 tablica i 61 slika. Bibliografski indeks obuhvaća 139 izvora, uključujući 42 strana.

U uvodu je potkrijepljena relevantnost teme, formulirana svrha i ciljevi istraživanja, prikazana je znanstvena novost i praktična važnost rada.

U prvom poglavlju (pregled literature) prikazani su podaci o kemijskom sastavu, spektru farmakološke aktivnosti, uporabi roda Artemisia L. u tradicionalnoj i modernoj medicinskoj praksi.

U drugom poglavlju (materijali i metode) prikazani su podaci o predmetima istraživanja, korištenim metodama, uređajima i reagensima, drugim metodološkim informacijama.

Treće i četvrto poglavlje daju podatke o proučavanju anatomskih i dijagnostičkih znakova Seversa S i jednogodišnjaka. Metodom

UV spektrofotometrijom određen je ukupni sadržaj flavonoida i tanina u predmetima istraživanja. Pomoću GC-MS istražen je kvalitativni i kvantitativni sastav eteričnog ulja i masnih kiselina pelina. Metoda HPLC-MS utvrdila je kvalitativni i kvantitativni sadržaj flavonoida. Elementarni sastav biljaka određen je AAS metodom. Razvijena je i predložena tehnika kvantificiranja sadržaja artemisinina. pomoću HPLC-MS. Također smo istražili kemijske sastave eteričnih ulja pet vrsta polinija koje se najčešće nalaze na području Burjatije i Mongolije - Gmelin Artemisia gmelinii Web wormwood. et Stechm., pelin, siva Artemisia glauca Pall, ex Wild., pelin, Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess., pelin sievers Artemisia sieversiana Willd. i Artemisia annua L.

U petom poglavlju nalaze se podaci o standardizaciji biljke Sivers i P. jednogodišnje, predložene kao obećavajući izvori chamazulena i artemisinina.

Glavni sadržaj rada

Predmeti i metode istraživanja. Predmet istraživanja bili su uzorci trave iz Sivera i godišnja sela prikupljena u različitim dijelovima Republike Burjatije (Ivolginski, Pribaikalski, Selenginski, Tunkinski, Zakamensky, Kurumkansky) regije Irkutsk (otok Olkhon) i Mongolija (Selenginsky Aimak) iz 2008. godine. do 2011

Mikroskopska analiza provedena je u skladu s člankom "Tehnika mikroskopske analize" (GF XI, broj 2) na Mikmed mikroskopima (Lomo, Rusija) s okularom 10x; leće 4x, 10x, 40x i MS-300 (TFXS), set fluorescentnih sustava (Micros, Austrija) s okularom 10x; leće 4x, 10x, 40x. Prinos sirovina određen je metodom obračunskih mjesta.

Ekstrakcija eteričnog ulja provedena je hidrodistilacijom, ekstrakti su dobiveni ultrazvučnom ekstrakcijom, ekstrakcijom CO2 i maceracijom.

Proučavanje kvalitativnog i kvantitativnog sastava ovih objekata provedeno je sljedećim metodama - GC-MS, HPLC-MS, TLC, BC, UV spektrofotometrija i AAS. Kromato-masena spektrometrijska analiza provedena je na plinskom kromatografu Agilent 6890 s HP MSD 5973N kvadrupolnim masenim spektrometrom (Agilent Technologies, USA; stupci: HP-5ms, g = 0,25 mm, debljina filma 0,25 μm (kopolimer - 5%, difenil) - 95% dimetilsiloksana) i DBWax s unutarnjim promjerom od 0,25 μm, plin nosač - helij, g) protok 1-1,5 ml / min; HPLC-MS analiza provedena je na visokodjelotvornim tekućim kromatografima Finnigan Surveyor (Thermo Scientific, USA) i Agilent 1200 (Agilent Technologies,

USA) s masenim selektivnim detektorom "LCQ Advantage MAX" ("ionska zamka") marke "Finnigan" (Thermo Scientific, SAD) i tandem masenim spektrometrijskim detektorom ("ionska zamka") 6330 (Agilent Technologies, USA), metoda ionizacijski elektrosprej; uvjeti: Hypersyl Gold Cl8, 5 mikrona, kolone 150x4 mm (Thermo electronic corporation, USA) i Zorbax Eclipse C18, 5 mikrona, 4,6 x 150 mm (Agilent Technologies, USA), brzina protoka eluensa 0,5 ml / min. TLC analiza je provedena na Sorbfil PTSH-P-A-UV pločama (Imid Ltd, Rusija); BC analiza je provedena na papiru FN 6 (Filtrak, Njemačka); Apsorpcijski spektri zabilježeni su na spektrometru StellarNet Green Waiv (StellarNet Inc, SAD), AAC analiza je provedena na SOLAAR MB spektrofotometru (Thermo science, SAD) i Varian modelu AA240 (Varian, Rusija).

Statistička obrada eksperimentalnih podataka provedena je metodom varijacijsko-statističke analize. Dio podataka obradio je CIM (programski paket Sirius verzija 6.0, Sustavi za raspoznavanje uzoraka, a / s, Norveška).

Farmakognostičke značajke biljke P. Sivers i P. ljeta. Sljedeći pokazatelji kvalitete medicinskih sirovina. Sivers pelinasta trava. Cijele sirovine. Čvrsti ili djelomično lisnati vrhovi cvjetnih stabljika ne dulji od 45 cm, ne sadrže krupne dijelove stabljike. Stabljika dlakava, ravna, rebrasta i razgranata. Radikalni i srednji listovi su petiolate, široko trokutasti, trostruki listićasti, duguljasti, izduženi, 1,4 - 2,5 cm dugi, 0,1 - 0,5 cm široki. Košare polukružne, 0,4 - 0,6 cm u promjeru, široke paničulno cvat. Rubni cvjetovi pištolja (ima ih oko 18). Cvijeće biseksualne, brojne, s ljevkastim vijencem.

Trava pelina godišnje. Cijele sirovine. Čvrsti ili djelomično lisnati vrhovi cvjetnih stabljika dužine do 50 cm, ne sadrže krupne dijelove stabljike. Stabljika je gola, ravna, izbrazdana, zelena na početku vegetacije, tamno ljubičasta na kraju. List donjeg i srednjeg lišća stabljike je jajolik ili ovalan, duljine 1,5-7,0 cm na peteljku, duljine eliptičnog oblika, bez krila, tri puta prekomjerno eksprimiran u široke segmente, segmente i segmente, dužine 0,5 do 0,8 cm, a ne široke. više od 0,2 cm. Košare promjera oko 0,2 cm u paničulnom cvatu.

Prilikom anatomskog proučavanja trave P. Siversa i P. jednogodišnje, utvrđeno je niz anatomskih i dijagnostičkih svojstava. Struktura lišća pelina prikazana je u tablici 1. Stabljika pelina Sivers je gruba, izdužene stanice epidermisa.

Postoje žlijezde eteričnih ulja, dlačice u obliku slova T i zaobljene ćelije stražnjice. Stabljika ima strukturu tipa snopa. U rebrima su područja vitkih. Kollanteralne grede raspoređene u krug karakterizira snažno razvijena sclerenchyma. Dobro obilježena endoderma, koja se sastoji od velikih, tankostijenih stanica okruglog oblika, čvrsto jedna uz drugu.

Karakteristike anatomske strukture listova p. Sivers i str.

Polje godišnjeg pelina epidermisa u Siversu

gornji ravan zid

donji zid namotaja je nizak

tip ustigicheskog aparata gornjeg anomocita

donji anomocit, puči više nego na gornjoj strani lista

ovalni oblik puči s lentilnim stomatalnim stanicama

Karakteristike dlaka gusto dlakavih dlačica u obliku slova T koje se sastoje od dvožilnih, četverokutnih nogu i višestaničnih češljastih dlačica, postoje dvije vrste dlačica - zvjezdasta i T-oblika s višestaničnom nogom

Strukture koje sadrže terpenoid su višestanične, velike žlijezde eteričnog ulja. shizogenske posude i nespecijalizirane parenhimske stanice

na mjestu jednogodišnjih, žljebastih, gotovo golih stabljika, izduženih stanica epidermisa. Na stabljici jednogodišnjeg, kao i na stabljici s. Siversa, pučkovnog tipa strukture, nalaze se žlijezde eteričnih ulja, rijetko dlačice i ovalne ćelije; U oba tipa pelina epidermalne stanice na cvjetnim cvjetovima su tankozidne, izdužene sa šiljastim krajevima, koje karakterizira prisutnost velikog broja žlijezda eteričnih ulja i odsutnost dlačica.

Pokazatelji trgovačke djelatnosti uspostavljeni su na nekoliko serija sirovina:

Sivers pelinasta trava. Vlaga (ne više od 7%), ukupni pepeo (ne više od 11%), pepeo netopljiv u 10% klorovodičnoj kiselini (ne više od 2%), ekstraktivne tvari (ne manje od 33%), listovi smeđi i pocrnjeli (ne više od 5%) ), organska nečistoća (ne više od 2%), mineralna nečistoća (ne više od 0,5%).

Trava pelina godišnje. Vlaga ne više od 7%, ukupni pepeo (ne više od 9%), pepeo nerastvorljiv u 10% klorovodičnoj kiselini (ne više od 1%), ekstraktivne tvari (ne manje od 42%), listovi smeđi i pocrnjeli (ne više od 5%), organske nečistoće (ne više od 2%), mineralne nečistoće (ne više od 0,5%).

Prema rezultatima preliminarne fitokemijske analize, eterično ulje, flavonoidi, tanini, hidroksicinamične kiseline, kumarini, masne kiseline i seskviterpenski laktoni pronađeni su u travi Siversa i P.

Zalihe Siversa i P. jednogodišnje. U tablici 2 prikazani su podaci o prinosima, biološkim (BZ) i operativnim rezervama (EZ) Siversa i godišnjim rastom u različitim područjima Burjatije.

Zalihe sirovina s. Sivers i str.

površina žetve (g / m2) ukupno E prerastanje, (ha) BS (kg) EZ (kg)

ENV. Grad Gusinoozersk 58.0 ± 4.1 0.8 530.0 398.4

ENV. a. Ganzurino 33,8 ± 2,4 0,4 154,4 116,0

ENV. a. Borati 220,6 ± 15,1 20,0 50160,0 41100,0

ENV. s Taphar-om 500.0 ± 26.3 0.5 2763.0 2237.0

ENV. a. Sotnikovo 240,2 ± 19,4 25,0 69750,0 52850,0

ENV. Ulan-Ude 500,0 ± 32,5 0,5 2815,0 2175,0

Kabansky okrug 285.SH = 19,7 30,0 97320,0 73680,0

Tunkinski Distrikt 70,0 ± 8,0 0,2 172,0 108,0

Pribaikalski okrug 280,9 ± 25,3 1,0 3315,0 2297,0

Kurumkansky okrug 370,6 ± 34,0 0,1 438,6 302,6

ENV. a. Hurumsha 228.0 ± 10.8 0.6 1497.6 1238.4

ENV. Stanovništvo 500,0 ± 46,2 30,0 177720,0 122280,0

ENV. a. Sotnikovo 39,0 ± 2,1 25,00 10800,0 8700,0

Okrug Kabansky 400,0 ± 27,1 30,0 136260,0 103740,0

Produktivnost nadzemnog dijela pelina Sivers i godišnjeg p. U ispitivanim šikarama kreće se od 33,8 ± 2,4 do 500,0 ± 32,5 g / m2 i od 39 ± 2,1 do 500 ± 46,2 g / m2. Biološke i operativne rezerve nadzemnih dijelova ispitivanih biljaka su 154,4-973,0 kg i 116,0-73680,0 kg (pelin Sivers), 1.497,6177720,0 kg i 1238,4-122280,0 kg (godišnji pelin).

Kemijsko istraživanje biljke P. Sivers i P. godišnjih flavonoida. Ukupni kvantitativni sadržaj flavonoida određen je općeprihvaćenom metodom spektrofotometrijskog određivanja trave Siversa i P. jednogodišnje, u smislu luteolin-7-glukozida u različitim fazama razvoja biljke (vegetacija, pupljenje, cvjetanje, plodnost). Najviši udio flavonoida utvrđen je u uzorcima Seversa i jednogodišnjim uzorcima prikupljenim u fazi pupoljka - 0,68 i 0,66%, a najmanji u sirovinama prikupljenim u fazi plodonošenja - 0,31% i 0,38% (Tablica 3).

Kvantitativni sadržaj količine flavonoida u smislu luteolin-7-glukozida u travi P. Siversa te u travi P. jednogodišnje, ovisno o vegetacijskoj fazi

faza razvoja biljke, količina flavonoida, u smislu luteolin-7-glukozida (%)

Pelin Sivers pelin godišnje

vegetacija 0,67 ± 0,02 0,64 ± 0,04

pupljenje 0,68 ± 0,05 0,66 ± 0,03

cvatnja 0,48 ± 0,03 0,52 ± 0,02

plodonice 0,31 ± 0,01 0,35 ± 0,01

Slijedeći flavonoidi detektirani su HPLC-MS metodom: rutin, luteolin-7-glukozid, krio-eriol, kvercetin u travi Siversa i trava jednogodišnje (Slika 1).

Slika 1. Kromatogram flavonoida i P. Sivers, P. jednogodišnji.

Za određivanje kvantitativnog sadržaja rutina, kriseriola, kvercetina u travi Siversa i trave jednogodišnje djece korištena je vanjska standardna metoda (Tablica 4).

U oba tipa pelina najveća količina sadrži luteolin-7-glukozid 0,04–0,08% (Sivers) i 0,88–1,77% (n. Jednogodišnje), kvercetin 0,001% (Sivers) i 0,0070,009% (n. godišnje).

Kvantitativni sadržaj flavonoida (HPLC-MS)

Sivers Wormwood Flavonoid kolekcija (%)

rutin kvercetin luteolin-7-glukozid

Ivolginski okrug, okr. a. Taphar, 0,002 ± 0,0001 0,001 ± 0,0002 0,040 ± 0,003

Ivolginski okrug, okr. p. Sotnikovo 0,002 ± 0,0002 0,001 ± 0,0001 0,080 ± 0,005

FLY je jedna godina star i Ivolginski okrug, okr. p. Sotnikovo 0,018 ± 0,001 0,007 ± 0,0003 0,880 ± 0,004

Kabansky okrug, okr. a. Žlica 0,012 ± 0,002 0,009 ± 0,0003 1,700 ± 0,005

Masne kiseline. Uzorci pelina sadrže od 8 do 13 masnih kiselina. Zajedničke za obje vrste su palmitinske (16: 0), linoleinske (18: 2p6), linolenske (18: ZpZ) kiseline, u količini od 56,87-82,67% (od ukupnih masnih kiselina) u Seversu, 58,36-67,19% u n. jednogodišnje (ukupnih masnih kiselina). Osim ovih kiselina, značajna količina sadrži 10-oktadekensku kiselinu (18: lp8) od 3,64% do 11,65%. Također, u svim uzorcima otkrivene su 10-metil-undekanske (¡° 12: 0) i 12-metil-tetradekanoične (i 15: 0) kiseline, čiji sadržaj ne prelazi 1%. Kromatogrami su prikazani na slici 2.

Sl. 2. Kromatogrami masnih kiselina (a) p Sivers i (b) p. Jednogodišnje (I - (16: 0), 2 - (18: 2p6), 3 - (18: ZPZ), 4 - (18: 1p8) ).

Elementarni sastav. U travi p. Siversa, koja raste u različitim regijama Burjatije, sadržaj kalcija iznosi 0,56 ± 0,02-0,89 ± 0,03%, magnezij - 0,12 ± 0,01-0,28 ± 0,01%. Najveći sadržaj kalcija i magnezija bilježi se u uzorcima sakupljenim u Kurumkanskom okrugu, a najmanji sadržaj magnezija u sirovinama iz Tunkinskoga okruga, a kalcij u biljkama prikupljenim u Selenginskom okrugu. Željezo se uglavnom nalazi u biljkama Kurumkanske regije

(141,25 ± 12,13 mg / kg), manje - iz okruga Selenginsky (141,25 ± 12,13 mg / kg).

Sadržaj cinka varira od 23,73 ± 1,56 do 59,8 ± 1,56 mg / kg - p. Sivers i od 55,32 ± 0,83 do 66,50 + 0,89 mg / kg je stara godinu dana, što je prihvatljivo za normalno funkcioniranje biokemijskih procesa. Sadržaj bakra je 8.42 ± 0.45-24.30 ± 1.56 mg / kg -n. Sivers, 9,37 + 0,18-13,48 + 0,44 mg / kg - stara godinu dana (potrebna količina je od 5 do 30 mg / kg). Nikal u travi Seabere sadrži 0,40 ± 0,01 -2,06 ± 0,03 mg / kg, što odgovara količini biljke od 0,1 do 5 mg / kg. Sadržaj kobalta u biljci ne smije prelaziti 1 mg / kg, olovo - 10 mg / kg, kadmij - 0,2 mg / kg, krom - 1,0 mg / kg (Kabata-Pendias, 1989; Kashin, 2009). U Sivers p. Sadržaj kobalta je manji od 0,3 mg / kg, olovo je 3,19 ± 0,11 mg / kg, u p. Jednogodišnji - 0,59 ± 0,02 mg / kg, kadmij - 0,18 ± 0,02 mg / kg, krom - 0,76 ± 0,02 mg / kg u svim uzorcima. Dakle, sadržaj makro i mikronutrijenata je u koncentracijama koje su normalne i dovoljne za protok vitalnih funkcija za biljke.

Sivers eterično ulje biljnog pelina. Eterično ulje iz biljaka izolirano je farmakopejskom metodom br. U raznim uzorcima sadržaja Sivers eteričnog ulja kreće se od 0,1 do 1,9%. U eteričnim uljima Siversa, koji rastu u različitim dijelovima Burjatije, identificirano je više od 80 spojeva.

Istražili smo sastav eteričnih ulja izoliranih iz trave pelina Sivers, koja raste u različitim dijelovima Burjatije.

(Ivolginski (1), Selenginski (2), Kurumkanski (3), Pribaikalski (4.9),

Tunkinsky (5), Zakamensky distrikti (8), Irkutska regija (otok Olkhon) (6) i Mongolija (7). Najveći prinos eteričnog ulja je u pelinu Sivers koji raste u Tunkinskom i Kurumkanskom području (0,4%). Minimalna količina nafte izolirana je iz biljaka prikupljenih na području Zakamensky, Pribaikalsky regije i Mongolije (0,1%) (Slika 3).

Proučavana je dinamika nakupljanja eteričnog ulja ovisno o fazi razvoja biljke (sl. 4). Rezultati su pokazali da se najveća količina ulja nakuplja u fazi cvatnje (0,6%) u

Sl. 3. Prinos eteričnog ulja p. Sivers s mjesta rasta.

faze pupanja i plodova akumuliraju istu količinu eteričnog ulja (oko 0,3%).

1- 1,8-daneol I-terpineal-4 3-p-farmaken '1 sišna-4,11-dnen

Sl. 5. Kromatogram eteričnog ulja str.

Sl. 4. Prinos eteričnog ulja str.

Sivers na različitim fazama razvoja biljke (sezona rasta, b - pupanje, c - cvjetanje,

Sve komponente eteričnog ulja mogu se podijeliti u dvije skupine - konstantne, tj. Pronađene u ulju u svim fazama razvoja biljaka i sporadično (manje). U svim uzorcima eteričnog ulja Siversa, neovisno o području uzgoja biljaka, 1,8-cineol (2,34–22,57%), terpineol-4 (0,964,70%), germacren E (8,66-12,36%), P-farnezen (0.64-5.17%), Selina-4,11-diena (0.97-4.66%), Neril-2-metilbutanoata (4.80-8.79%) i Chamazulena (0.60-25.36%) (Sl. 5).

Eterična ulja, izolirana iz biljaka koje raste u stepskim područjima, u Pribaikalskom okrugu (25,36%), sadrže najmanju količinu hamazulena, a najmanja - u Zakamensky (0,60%).

U sastavu eteričnog ulja izoliranog iz biljaka u različitim fazama razvoja - vegetacija, pupljenje, cvjetanje i plodnost, identificirano je 54 spoja. Konstantne komponente su 1,8-cineol, linalool, terpineol-4, a-terpineol, p-farnezen, selina-4,11-dien, chamazulen.

Sadržaj chamazulena varira od 0,20 do 24,69% u fazi vegetacije, od 21,34 do 61,91% u fazi pupljenja, od 1,53 do 34,42% u fazi cvatnje, od 10,87 do 20,64% u fazi plodonošenja. Skup sporadično pojavljivih komponenti je značajan (do 40 spojeva) u isto vrijeme njihov nizak kvantitativni sadržaj, pa je teško odrediti ovisnost njihovog sastava o fazi razvoja biljke.

Za procjenu utjecaja razvojne faze na sastojke ulja korišten je CIM (slika 6).

Sl. 6. GK-model ovisno o sastavu

eterično ulje iz razvojne faze Siversa (I-vegetacija, 2-pupljenje, 3-cvjetanje, 4-plodna)

ovo je jedna od analiza

višedimenzionalni podaci koji omogućuju alokaciju skrivenih varijabli u velikim podatkovnim nizovima i analizu odnosa,

postojećeg sustava. Cilj metode glavne komponente je zamijeniti izvorni opis uzoraka pomoću p varijabli za novi oblik, prikazan u prostoru glavnih komponenata (Esbenson, 2010).

Na GK-modelu moguće je razlikovati odvojena područja koja su međusobno razgraničena i koja odgovaraju različitim fazama razvoja Siversovog pelina, što ukazuje da se sastav ulja u različitim fazama razvoja razlikuje po sadržaju manjih spojeva.

Dakle, u različitim fazama razvoja Siversa, kvalitativni sastav eteričnog ulja podjednako se poklapa i razlikuje se kod manjih spojeva.

Studija o fazama razvoja biljaka pokazala je da je najveća količina šamazulena u eteričnom ulju Seversa koncentrirana u fazama pupljenja i cvatnje, dok je akumulacija ulja u fazi cvatnje veća nego u fazi pupanja. Stoga smo tijekom ovih faza proučavali osobitosti akumulacije eteričnih ulja u različitim dijelovima biljke (Sl. 7).

O fazi pupljenja U fazi cvatnje

Sl. 7. Prinos eteričnog ulja u različitim dijelovima Siversa.

Ekstrahirajuće eterično ulje iz različitih dijelova biljaka u fazi cvjetanja pokazalo je da su cvatovi (košare) karakterizirani najvećim prinosom, lišće je manje, a stabljike minimalne. U fazi

pupanje u travi P. Siversa najviše je sadržavalo ulje u pupoljcima, nešto manje u listovima i minimalnu količinu ulja u stabljikama.

Analiza eteričnog ulja iz različitih dijelova biljke pokazala je da je sastavni dio ulja izvađen iz cvatova i travnih pupoljaka Siversa najrazličitiji od više od 70 komponenti, zatim više od 40 komponenti iz listova i manje od svih spojeva u ulju izvađenoj iz stabljika su oko 20 komponente. Stalne komponente uzoraka eteričnih ulja, bez obzira na njihovu lokaciju, su 1,8-cineol, linalool, terpineol-4, germacren 13, a-terpineol, a-bisabolol i chamazulen (Tablica 5).

Stalne komponente esencijalnog ulja pelina Sivers

sadržaj komponenata u% cijelog ulja

faza cvjetanja u fazi cvjetanja

cvatovi ostavlja stabljike pupova ostavlja stabljike

1,8-cineol 8,00 6,39 6,04 1,94 + 23,41

linalool 5,93 1,38 0,65 + 3,83

terpineol-4 2.56 2.10 0.57 0.88 + 5.37

a-terpineol 2.39 2.10 0.82 1.44 + 4.66

Germakren E 7.20 7.81 1.96 11.18 7.81 10.57

a-bisabolol 2,28 1,25 1,66 5,24 10,93 5,86

Chamazulene 6.23 23.02 37.11 7.81 21.17 3.51

Analiza je pokazala da se u različitim područjima rasta, u različitim fazama razvoja iu različitim dijelovima Seversa, kvalitativni sastav eteričnog ulja konstantno podudara i razlikuje se sporadično pojavljivanjem spojeva.

Eterično ulje pelinske godišnje biljke. Kao iu prvom slučaju, izbor eteričnog ulja proveden je farmakopejskom metodom br. Kemijski sastav godišnjih eteričnih ulja predstavlja 40 komponenti. Stalne komponente su keton artemisije (10,24–14,62%), kariofilen (9,93–10,71%), germacren B (3,53–7,82%), p-selenen (21,75–29,46%), kariofilen oksid (4,44–14,31%) (sl. 8).

U različitim fazama razvoja biljke, iz biljke pelina izvađeno je 0,5 do 0,7% eteričnog ulja. Najveći prinos eteričnog ulja u fazi cvatnje (0,7%) (Sl.9).

U svim fazama razvoja biljaka u eteričnom ulju nalaze se artemizijski keton, kariofilen (3-selen, kariofilenski oksid), a kvantitativni sadržaj glavnih sastojaka mijenja se u različitim fazama razvoja biljke. i karyofillen oksid - u fazi cvatnje.

3. Kromatogram eteričnog ulja str.

Sl. 9. Prinos eteričnog ulja p. Godišnje u različitim fazama razvoja biljaka (vegetacija, b-pupoljak, c-cvjetanje, p-plodnost).

Žlijezde eteričnih ulja neravnomjerno su raspoređene u biljci, stoga se iz različitih dijelova biljke mogu razlikovati eterična ulja koja se razlikuju i kvantitativno i kvalitativno.

Utvrđene su posebnosti nakupljanja eteričnih ulja u fazi cvatnje u različitim dijelovima godišnjeg pelina (sl. 10).

Više od 60 spojeva pronađeno je u eteričnim uljima iz različitih dijelova biljke. konstanta

sastojci za ulja iz cvatova, listova, stabljika su artemisia alkohol, p-kariofilen, oksid

Glavna komponenta godišnjeg eteričnog ulja je keton artemizije - ne nalazi se u ulju iz stabljika, iako je pola u ulju iz cvatova (49,14%) i gotovo trećina listova (29,76%).

Analiza eteričnih ulja pokazala je da u različitim područjima rasta, u različitim fazama razvoja iu različitim dijelovima n. Godišnja trava, kao i trava n. Sievers, kvalitativni sastav eteričnog ulja je isti u konstantnim i različitim u sporadično pojavljivim komponentama.

Razvoj metode za kvantitativno određivanje artemizinina u pelinu godišnjom metodom HPLC-MS

Odabir uvjeta za kvantitativnu ekstrakciju artemizina iz godišnjeg pelina. Razviti kvantitativnu metodologiju

Slika 1 od Sl. 10. Prinos eteričnog ulja u različitim dijelovima godišnje (1-cvat, 2-listovi, 3-stabljike).

Određivanja artemizinina u travi P. jednogodišnjih ekstrakcijskih uvjeta odabrana su prema kojima ekstrakcija artemizinina doseže svoju maksimalnu vrijednost. Analizirani su ekstrakti dobiveni metodama maceracije, ultrazvučne ekstrakcije i subkritične CO2 ekstrakcije. Kao ekstrakti su korištena različita otapala (Tablica 6). Sadržaj artemizinina u ekstraktima razdvojenim ekstrakcijom ultrazvukom i maceracijom pomoću različitih otapala nije značajno različit (0,038-0,040%). Najveća količina artemizinina (0,054%) sadržana je u ekstraktu dobivenom tijekom ekstrakcije subkritičnim CO2.

Metode i parametri za vađenje ekstrakata iz trave pelina jednogodišnji pomoću različitih metoda ekstrakcije ______

vrijeme ekstrakcije ekstrakcijskog postupka / parametri ekstrakcije sadržaj artemisinina u%, u smislu a.s.s.

etanol 24 sata / odnos sirovina: otapalo (1: 5), T = 25 ° S 0,040 ± 0,002

Maceracija etanol 48 h / odnos sirovina: otapalo (1: 5), T = 25 ° S 0,038 ± 0,002

Omjer heksana 24 h / uzorak: otapalo (1: 5), T = 25 ° S 0,039 ± 0,002

etil acetat 15 minuta / odnos sirovina: otapalo (1: 5), frekvencija sondiranja 50 kHz, T = 25 ° S 0,022 ± 0,001

etanol 5 min. / odnos sirovina: otapalo (1: 5), frekvencija zvuka 50 KHz, T = 25 ° S 0,022 ± 0,001

Ultrazvučna ekstrakcija etanola 10 min. / Odnos sirovina: otapalo (1: 5), frekvencija zvuka 50 KHz, T = 25 ° S 0,024 ± 0,001

etanol 15 min. / odnos sirovina: otapalo (1: 5), frekvencija zvuka 50 KHz, T = 25 ° C, C 0,039 ± 0,002

etanol 20 min / odnos sirovina: otapalo (1: 5), frekvencija zvuka 50 kHz, T = 25 ° S 0,039 ± 0,002

CO2-ekstrakcija CO2 24 h.1 brzina protoka 30 l / h, T = 20-22 ° C, P = 6.0-6.2MPa 0.054 ± 0.003

Od svih predloženih metoda ekstrakcije, ultrazvučna ekstrakcija je optimalna (etanolni ekstraktant), jer je ova metoda brza (vrijeme ekstrakcije 15 minuta) i dostupno instrumentacijom.

Metoda kvantitativnog određivanja artemizinina.

Razvoj tehnike za kvantitativno određivanje artemizinina u biljci godišnje proveden je pomoću HPLC-MS. Koristili smo Agilent 1200 HPLC s MC - detektorom ("ionska zamka") 6330, ionizacijskom metodom - elektrosprej. Elucija je provedena u izokratnom načinu (50% (A): 50% (B)), pri čemu je sastav početnog pufera (A) - vodena otopina mravlje kiseline (pH = 3) + 2 ml zasićene otopine amonijevog acetata, pufer za ispiranje (B) - 100% acetonitril. Volumetrijska brzina protoka eluensa je 0,5 ml / min, volumen injektiranog uzorka je -25 μl. Ioni su zabilježeni u modu praćenja pozitivno nabijenih iona (SRM) s masom od 300 (zbog dodavanja NrH4 iona u molekulu artemizinina), širine prozora (299301) m / z. Rezultati su potvrđeni tandem-masenom spektrometrijom, a kćerni ion (MS2) mase 223 m / z dobiven je iz matičnog iona (MS) mase 300 m / z.

Koincidencija retencijskih vremena i masenog spektra artemizinina, određenog u travi jednogodišnje djece s uporabom CO otopine naznačenog spoja, omogućuje nam da zaključimo da je čisti spoj identičan čistom artemisininu (sl. 11, 12).

Sl. 11. Kromatogram CO artemisinina i P. godišnjeg ekstrakta.

iv ix jaztžjaauat asss »

Slika 12. Maseni spektri a) artemisinina sadržanog u n. Godišnjoj travi, b) artemizinina CO.

Za kromatografsko-masenu spektrometriju korištena je apsolutna kalibracijska metoda za kvantitativnu analizu. Za određivanje koeficijenta kalibracijske krivulje pripremljeno je nekoliko (najmanje 20) kalibracijskih otopina artemizisina. Priprema otopina provedena je kako slijedi: 5 x 10 "3 g artemizinina su odvagani, stavljeni u volumetrijsku tikvicu od 50 ml, dodano je 25 ml acetonitrila. Sadržaj tikvice

temeljito miješati do potpunog otapanja, nakon čega se volumen u tikvici dovede do oznake destiliranom vodom. Provedena je analiza pri različitom volumenu injektiranog uzorka od 1 do 40 μl. Mjerena je površina pika u kromatogramima. Prema dobivenim podacima konstruirana je kalibracijska krivulja (sl. 13). Vrijednosti površine vrha prikazane su na osi ordinate, a odgovarajuće vrijednosti sadržaja artemisinina (g) prikazane su na osi apscise.

Iz dobivenih podataka izračunat je koeficijent kalibracijske krivulje: k = B / h, gdje je k koeficijent kalibracijske krivulje, 5 je površina pika analizirane otopine, h je sadržaj artemisinina (g)

Koeficijent kalibracijske krivulje (k) definira se kao aritmetička sredina koeficijenata k,.

Sl. 13. Dijagram za određivanje sadržaja artemisinina.

Sadržaj artemizinina u jednogodišnjem ekstraktu pelina određen je formulom: C = 5 / c, gdje je 5 površina pika artemizinina u analiziranoj otopini, a k je koeficijent kalibracijske krivulje. Mjeriteljski podaci o određivanju koeficijenta kalibracijske krivulje (k) dani su u tablici 7. t

Metrološke značajke izračuna koeficijenta kalibracijske krivulje artemisinin

1 X Э 2 Ю Д) Dh E,%

19 1.32 * 10m 1.84 * O15 4.25 * 10 "95 2.09 1.28 * 10" 1.97 1.90 * 10 "

Rezultati kvantitativnog određivanja artemizinina u ekstraktu pelina prikazani su u tablici 8. t

Rezultati kvantitativnog određivanja artemizinina u ekstraktu pelina jednogodišnje metode HPLC-MS

Mjeriteljske značajke (n = 5, P = 95%)

0.039 0.75 * 10 "0.27 * 10" 2 2.57 0.83 * 10 ° 1.21 0.12 * 10 "'

Razvijena metoda utvrdila je kvantitativni sadržaj artemisinina u travi u dobi od jedne godine u fazi cvatnje (Tablica 9). Tehnika je potvrđena - specifičnost, preciznost potvrđena.

Sadržaj artemisinina u travi pelina godišnje

Artemisinin područje i datum prikupljanja (%)

Ivolginski okrug, 10 km od Sotnikova, 08/12/2010 0.054 ± 0.003

Ivolginhiy rn, 10 km od Sotnikova, 22.08.2011. 0.027 ^.001

Ivolginski okrug, okr. a. Oriole, 19.08.2011. 0,069 ± 0,004

Kabansky okrug, okr. a. Tarakanovka, 08.22.2011. 0,023 ± 0,001

U uzorcima prikupljenim u regiji Ivolginsky, u blizini Oriole sadrži najveću količinu artemizinina (0,069%), a najmanji u uzorcima iz okruga Kabansky, okr. a. Žohara (0,023%). Utvrđeno je da se najveća količina biljke artemizinina koncentrira u fazi cvatnje - 0,039%, a najmanja - u vegetacijskoj i pupi fazi - od 0,006 do 0,007%. Artemizinovi cvatovi sadrže - 0,029%, nešto manje - 0,021% u listovima, a minimalna količina u stabljikama 0,007% (Tablica 10).

Sadržaj artemizinina u travi pelina godišnje, ovisno o fazi vegetacije, u različitim dijelovima biljke

razvojnu fazu postrojenja

vegetacija pupi cvjetanje lišće cvat stabljike

0,006 ± 0,0002 0,007 ± 0,0002 0,039 ± 0,003 0,021 ± 0,001 0,029 ± 0,002 0,007 ± 0,0002

Dakle, optimalno vrijeme za skupljanje trave godišnjeg pelina je faza cvjetanja, te je poželjno prikupiti cijeli zračni dio.

Svi dobiveni rezultati uključeni su u projekte FS-a na travi pelina Sivers i biljci godišnjeg pelina.

Otkrivene su glavne dijagnostičke značajke trave Siversa i P. jednogodišnje trave, razvijeni su numerički pokazatelji potrebni za standardizaciju sirovina. Identificirane su rezerve Siversa i P. koje rastu na različitim područjima Republike Burjatije.

2. Utvrđen je sadržaj flavonoida, masnih kiselina, makro-i mikronutrijenata u travi Siversa n i u travi n. Flavonoidi - luteolin-7-glukozid, rutin, kvercetin i krioeriol detektirani su HPLC-MS metodom u ovim biljkama. Glavne masne kiseline u istraživanim vrstama pelina su palmitinska, linolna, linolenska, 10% oktadekenska kiselina također se nalazi u značajnom pelinu.

3. Utvrđeno je da kvalitativni sastav biljnih eteričnih ulja ostaje konstantan bez obzira na mjesto rasta i fazu razvoja. Konstantne komponente Sivers su 1,8-cineol, terpineol-4, D germacren, p-farnesen, Selina-4,11-dien, neil-2-metilbutanoat i chamazulen, i Artemisia ketone, karyofillen, Hermacrene D, p-selenen, kariofilni oksid. Akumulacija eteričnog ulja u fazi cvatnje veća je (0,7%) nego u fazi pupanja (0,3%). Najveća količina chamazulena p. Siversa akumulira se u fazama pupljenja (do 62%) i cvatnje (do 34%).

4. Utvrđeni su uvjeti za ekstrakciju artemisinina (vrsta ekstraktanta, metoda ekstrakcije, vrijeme ekstrakcije) iz godišnje biljke i utvrđeno je da se maksimalna ekstrakcija artemizinina postiže ultrazvučnom i prekristikalnom ekstrakcijom CO2. Razvijena je metoda za kvantitativno određivanje artemizinina i validirana u jednogodišnjoj HPLC-MS metodi (relativna pogreška određivanja ± 1,21%). Utvrđeno je da se najveća količina artemizinina u travi godišnje biljke akumulira tijekom faze cvatnje u cvatovima (0,039%).

5. Izrađeni dokumenti regulative za sirovine - projekt FS-a „Travnja pelina Sivers“ i projekt FS „Trava pelina jednogodišnja“.

Popis radova objavljenih na temu disertacije

1. Zhigzhitzhapova, C.B. Kemijski sastav eteričnog ulja Artemisia gmelinii Web. et Stechm, porijeklom iz srednje Azije / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva i Plant Chemistry.-2010.-№2.-S. 131-133.

2. Zhigzhitzhapova, C.B. Kemijski sastav Siversovog eteričnog ulja pelina Artemisia sieversiana Willd., Odrastao u Burjatji / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bilten državnog sveučilišta Buryat. Ser. Kemija-fizika. - 2009. -S. 3. - 69-71.

3. Zhigzhitzhapova, C.B. Sastav Sivers eteričnog ulja pelina Artemisia sieversiana Willd., Odrastao u Burjatiji i Irkutskoj regiji / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva, V.V. Taraskin // Bilten Istočno-Sibirskog znanstvenog centra Sibirskog ogranka Ruske akademije medicinskih znanosti. - 2009. - №2 (66). C. 103-105.

4. Zhigzhitzhapova, S.V. Sastav eteričnog ulja Artemisia sieversiana Willd. u različitim fazama razvoja biljke / S.V. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // Bilten Istočno-Sibirskog znanstvenog centra Sibirskog ogranka Ruske akademije medicinskih znanosti. - 2011. - №1 (77). Dio 2. - str.

5. Soktoeva, TE Sastavni dio eteričnog ulja Artemisia glauca Pall, ex Willd. flora Mongolije / T.E. Soktoeva, S.V. Zhigzhitzhapova, LD

Radnaeva, B.B. Taraskin // Bilten mladih znanstvenika. - Tomsk, 2011. -Vyp. 2. - 27-30.

6. Soktoeva, TE Kemijski sastav eteričnog ulja Artemisia gmelinii Web. Et Stechm. / T.E. Soktoev // Lomonosov-2009: materijali XVI. Conf. studenti, diplomski studenti i mladi znanstvenici. - Moskva, 2009. - str.

7. Zhigzhitzhapova, C.B. Eterično ulje pelina Gmelin flora Burjatija i Mongolija / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // “Nova dostignuća u kemiji i kemijskoj tehnologiji biljnih sirovina”: materijali IV Sve-Rusije. znanstvena. Conf. - Barnaul, 2009. - 49-50.

8. Soktoeva, T.E. Sastav eteričnog ulja Sivers pelina Artemisia sieversiana Willd., Koji raste u Republici Burjatiji / T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // “Tehnologije i oprema kemijske, biotehnološke i prehrambene industrije”: materijali II. Scien. Conf. studenti, diplomski studenti i mladi znanstvenici. - Biysk, 2009. - str.

9. Pavlova E.T. Kromatografsko razdvajanje i kvantitativno određivanje komponenti lijekova pomoću HPLC / TE Soktoeva, T.A. Kolodin // “Problemi održivog razvoja regije”: materijali 5. škole-seminara mladih znanstvenika Rusije. - Ulan-Ude, 2009. - 222-223.

10. Zhigzhitzhapova, S.V. Usporedna analiza kemijskih sastava Artemisia L., raste u Srednjoj Aziji / S.V. Zhigzhitzhapova, T.E. Soktoeva, L.D. Radnaeva, O. Grahl-Nilsen // “Modemske metode analize podataka” Sedmi zimski simpozij o kemometriji. - Sankt Peterburg, 2010. - 82-83.

11. Soktoeva, T.E. Usporedna analiza sastava eteričnih ulja poline vrste Artemisia L., uzgojene u Središnjoj Aziji / TE Soktoeva // "Ekološki prihvatljive tehnologije i materijali koji štede resurse": materijali regije, znanost mladih. Conf. iz intern. sudjelovanje. - Ulan-Ude, 2010.-S. 109-110.

12. Zhigzhitzhapova, C.B. Eterična ulja iz roda Artemisia L. / C. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // “Razvoj tradicionalne medicine u Rusiji: iskustvo, istraživanje, perspektive”: materijali naučni. Conf. iz intern. sudjelovanje. - Ulan-Ude, 2010. - 405-407.

13. Soktoeva, T.E. Sastav eteričnog ulja braće i sestara pelina Artemisia sieversiana Willd. / T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // “Aktualne studije Bajkalske Azije”: materijali Intern. Scien. Conf, - Ulan-Ude, 2010. - 309-312.

14. Badmaeva, E.E. Sastav eteričnog ulja Artemisia macrocephala Jacq. ex Bess raste u Mongoliji / E.E. Badmaeva,

TE Soktoeva // “Ekologija Rusije i susjednih teritorija”: materijali XV. okolišni con. - Novosibirsk, 2010. - str.

15. Badmaeva, E.E. Sastav eteričnog ulja Artemisia annua / EE. Badmaeva, T.E. Soktoyeva, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // "Ekološki prihvatljive tehnologije koje štede resurse": materijali Vseross. konferenciji za mlade. iz intern. sudjelovanje. - Ulan-Ude, 2011. - C. 156-157.

16. Soktoeva, T.E. Ekstrakcija artemizinina iz pelina godišnje Artemisia annua L. / T.E. Soktoeva, G.L. Ryzhov, K.A. Dychko, V.V. Khasanov, C.B. Zhigzhitzhapova, LD Radnaeva // “Prioriteti i obilježja razvoja Bajkalskog kraja”: materijali V. međunarodnog. Scien. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - 127-128.

17. Zhigzhitzhapova, C.B. Kemijski sastav Artemisia annua L. / C.B. Zhigzhitzhapova, TE Soktoeva, LD Radnaeva // “Vegetacija Bajkalske regije i susjednih teritorija”: materijali iz Vserosa. Scien. Conf. - Ulan-Ude, 2011. - 152-153.

AAS atomska apsorpcijska spektrofotometrija

as apsolutno suhe sirovine

BAS biološki aktivne tvari

GZ biološke rezerve

BH papirna kromatografija

Svjetska zdravstvena organizacija Svjetske zdravstvene organizacije

HPLC-MS tekuća masena kromatografija visokog učinka

GF State Pharmacopoeia

ISC metoda glavnih komponenti

Uzorak standardnog CO

one tankoslojne kromatografije

Operativne rezerve EZ

SRM Odaberite praćenje reakcije

Autor izražava iskrenu zahvalnost voditelju studija, prof. LD Radnaeva, kao i dr.sc., izvanredni profesor, viši istraživač Baikalski institut za upravljanje prirodnim resursima Sibirskog ogranka Ruske akademije znanosti Zhigzhitzhapova C.B., doktorica kemije, počasni profesor Tomsk Državno sveučilište Ryzhova G.L. za pomoć i podršku u pripremi rada.

Format je 60x84 1/16. Offset papir. Volumen 1,5 ppe. l. Tiraž 100. Redni broj 67.

Tiskano u tiskari izdavačke kuće BNTS SB RAS. 670047 Ulan-Ude, ul. Ul. Sakhyanova, 6.

Sadržaj teze Soktoeva, Tuyana Erdemovna :: 2011 :: Ulan-Ude

Poglavlje 1. PREGLED KNJIŽEVNOSTI

Trenutno stanje istraživanja o istraživanju roda Artemisia L.

1.1. Botanička svojstva pelina Sivers i dvanaestog godišnjeg pelina

1.2. Eterična ulja i biljke prirodnog azulena roda Wormwood

1.2.1. Kemijski sastav eteričnih ulja i prirodnih azulena 14 biljaka roda Wormwood

1.2.2. Upotreba eteričnih ulja biljaka roda Wormwood u medicini

1.2. Artemisinin: otkriće, struktura i sinteza, fizikalno-kemijska svojstva, mehanizam djelovanja antiplasmodija

1.3. Sastav masnih kiselina biljaka roda Wormwood

1.4. Fenolni spojevi biljaka roda Wormwood

1.5. Elementarni sastav biljaka roda Wormwood 38 ZAKLJUČCI NA POGLAVLJE

POGLAVLJE 2. OBILJEŽJA OBJEKATA I METODA 41 ISTRAŽIVANJE

2.1. Predmeti istraživanja, uzorci sirovina - trava Sivers pelina i 41 ljekovito bilje pelina godišnje

2.2. Metode istraživanja

2.2.1. Biološke metode istraživanja

2.2.1.1. Anatomska i dijagnostička studija

2.2.1.2. Istraživanje resursa

2.2.2. Metode za kvalitativno i kvantitativno određivanje 43 biološki aktivne tvari

2.2.3. Analiza robne razmjene: metode za uspostavu 50 kvalitetnih sirovina

2.2.4. Metode statističke obrade. Metoda glavne komponente.

POGLAVLJE 3. FARMAKOGNOSTIČKA ANALIZA BILJNOG HERBALISA 53 CIVERI

3.1. Mikroskopska analiza pelina Sivers

3.2. Zalihe pelena Sibers

3.3. Studija pelina glavne trave braće i sestara BAS-a

3.3.1. Kvalitativni i kvantitativni sadržaj komponenti 64 eterično ulje pelina Sivers

3.3.1.1. Kemijski sastav i dinamika nakupljanja eteričnog ulja i 64 hamazulena u travi pelina Sivers u različitim područjima Burjatije

3.3.1.2. Osobitosti akumulacije eteričnog ulja i chamazulena u travi od 65 Sivers pelina u različitim fazama razvoja biljke

3.3.1.3. Akumulacija manjih komponenti eteričnog ulja trave 71 Sivers pelina

3.3.1.4. Značajke akumulacije eteričnog ulja i chamazulena u travi 72 Sivers pelina iz različitih dijelova biljke

3.3.2. Kvalitativni i kvantitativni sadržaj flavonoida i tanina u travi pelina Sivers

3.3.3. Masno-kiselinski sastav trave pelina Sivers

3.3.4. Elementarni sastav biljnog pelina godišnje ZAKLJUČCI U POGLAVLJE

POGLAVLJE 4. FARMAKOGNOSTIČKA ANALIZA BILJNIH BILJAKA 83 GODINA

4.1. Mikroskopska analiza biljnog pelina godišnje

4.2. Dionice pelina godišnje

4.3. Godišnje proučavanje glavnog BAS trave pelina

4.3.1. Kvalitativni i kvantitativni sadržaj sastojaka eteričnog ulja u biljnoj pelini godišnje

4.3.1.1. Kemijski sastav i dinamika nakupljanja eteričnog ulja u 92 trave jednogodišnjeg pelina s različitih mjesta rasta

4.3.1.2. Osobitosti akumulacije eteričnog ulja u travi pelina godišnje na različitim fazama razvoja iu različitim dijelovima postrojenja

4.3.2. Kvalitativno i kvantitativno određivanje trave flavonoida 100 pelina godišnje

4.3.3. Sastav masnih kiselina u biljnoj pelini godišnje ^ ® *

4.3.4. Elementarni sastav biljke pelina godišnje

4.4. Razvoj metode za kvantitativno određivanje artemizinina u 103 trave pelina godišnjom metodom HPLC-MS

4.4.1. Izbor uvjeta za kvantitativnu ekstrakciju artemizina iz 103 jednogodišnjeg pelina

4.4.2. Razvoj tehnike za kvantitativno određivanje artemizinina 104 pomoću HPLC-MS

4.4.3. Kvantitativni sadržaj artemisinina u godišnjem pelinu s različitih mjesta rasta

4.4.4. Analiza kvantitativnog sadržaja artemisinina u travi godišnje na različitim fazama razvoja i na različitim dijelovima biljke

POGLAVLJE 5. POSTAVLJANJE POKAZATELJA 111 KVALITETA SIROVINA

5.1. Morfometrijski pokazatelji sirovina

5.2. Standardizacija pelina trava i sestara

5.2.1. Pokazatelji trgovanja trava pragovi pelina!

5.2.2. Standardizacija Siversovog pelinog bilja prema sadržaju 115 hamazulena u sastavu eteričnog ulja

5.2.3. Utvrđivanje roka trajanja peludne trave u Siversu

5.3. Standardizacija biljnog pelina godišnje ^ ^ ^

5.3.1. Pokazatelji roba trava sabljarka godišnje * '^

5.3.2. Standardizacija godišnjeg biljnog pelina na sadržaj artemisinina

5.3.3. Određivanje roka trajanja biljnog pelina godišnje

Uvod u rad na temu "Farmaceutska kemija, farmakognozija", Soktoeva, Tuyana Erdemovna, sažetak

Relevantnost teme. Biljke roda Artemisia (pelin) su obećavajući izvori biološki aktivnih tvari, kao što je pelud od pepela Artemisia dracunculus L., pelin Artemisia absinthium L., pelin Artemisia vulgaris L. koji se često koristi u narodnoj, tradicionalnoj medicini i prehrambenoj industriji. Godišnji pelin Artemisia annua L. uspješno je uveden u kulturu u mnogim zemljama, a 2001. godine preporučila ga je WHO kao glavni izvor artemisinina, prvog izbora za liječenje malarije. Danas zemlje koje proizvode artemisinin osiguravaju oko četvrtine globalnih zdravstvenih potreba [1, 2]. Iz jednogodišnje godine izolirano je 137 biološki aktivnih spojeva, uključujući 40 sesquiterpena, 10 triterpena, 7 kumarina, 46 flavonoida, što može poslužiti kao osnova za razvoj lijekova [3]. Osamdesetih godina dvadesetog stoljeća skupina znanstvenika [4] pokušala je uzgojiti divlje uzgojni dio jednogodišnje flore SSSR-a u ULI-u (Moskva). Danas se veliki radovi na uvođenju predmeta prve godine provode na Državnom sveučilištu Tomsk. U Buryatia n. Godišnja je divlja vrsta.

Zajedno s jednogodišnjom u Burjatiji, Sivers pelin Artemisia sieversiana Willd je široko rasprostranjena, što je također obećavajuća vrsta. U travi P. Sieversa sadrže flavonoide, eterično ulje, kumarine [5-8]. Eterično ulje Seabere od interesa je kao izvor Chamazulena, netoksičnog spoja s protuupalnim, baktericidnim, regenerativnim učincima [9, 10].

Do sada nije provedena detaljna kemijska studija pelina i pelina Siversa godišnje flore Burjatije kao obećavajućih izvora biološki aktivnih tvari, stoga je njihovo proučavanje hitan zadatak.

Cilj: Farmakognostičko proučavanje Siversovog pelina Artemisia sieversiana Willd. i pelin godišnje Artemisia annua L. kao vrijedni izvori biološki aktivnih tvari.

Za postizanje tog cilja potrebno je riješiti sljedeće zadatke:

1. Identificirajte anatomske i dijagnostičke značajke nadzemnog dijela Siversa i p. Jednogodišnje, utvrdite robne pokazatelje sirovina, ocijenite rezerve i mogućnost berbe jednogodišnjih i Siversa na području Republike Burjatije;

3. Razviti metodu za kvantitativno određivanje artemizinina u nadzemnom dijelu jednogodišnjaka;

Znanstvena novost. Utvrđene su glavne dijagnostičke značajke trave Sivers i P. godišnje, razvijeni su numerički pokazatelji potrebni za standardizaciju sirovina.

Utvrđeni pokazatelji kvalitete BAS-a uključeni su u regulatorne dokumente.

Praktično značenje. Rezerve i mogući godišnji volumen nabave naselja Sivers i jednogodišnje naselje na području Republike Burjatije (naselje Sivers - od 0,1 do 73,7 tona godišnje, te naselje od godinu dana - od 1,2 do 122,3 tone godišnje).

Provedena je standardizacija sirovina, razvijeni su FS projekti - „Sivers Wormwood Herbal“ i „Wormwood One-Grass“.

Radovi su provedeni u sklopu istraživačkih projekata: RFBR: 08-04-90202-Monga „Studija biogenetskih obrazaca biosinteze biološki aktivnih spojeva endemičnih biljaka Središnje Azije“ (2008–2009), br. 08-04-9803 7-rsibirya i

Kemijski sastav biljaka kao pokazatelj stanja ekosustava Bajkalskog kraja "(2008-2010); interdisciplinarni integracijski projekt №93 "Razvoj istraživanja u području medicinske kemije i farmakologije kao znanstvene osnove za razvoj domaćih lijekova"; zajednički projekt s Akademijom znanosti Mongolije "Dobivanje novih lipo-i nanosomalnih oblika lijekova pomoću prirodnih sirovina"; RFBR: № 10-03-16001-mobzros “Mobilnost mladih znanstvenika” (2010), №11-03-90705-mobst znanstveni rad (obuka) mladih ruskih znanstvenika u vodećim znanstvenim organizacijama Ruske Federacije 2011 (2011).

U obranu se izvode:

• rezultati istraživanja anatomske strukture, zaliha, kriterija autentičnosti Siversa i P., raste u Burjatji;

• rezultati kemijskog ispitivanja biološki aktivnih tvari i njihova sezonska dinamika akumulacije;

• rezultati studija o standardizaciji nadzemnog dijela Siversa i str.